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使用檢測(cè)試劑盒一般會(huì)遇到哪些問(wèn)題？

發(fā)布時(shí)間： 2022-12-23　　點(diǎn)擊次數(shù)： 506次

　　檢測(cè)試劑盒保持了傳統(tǒng)ELISA法的快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，并讓實(shí)驗(yàn)過(guò)程更簡(jiǎn)單更輕松，我司為生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，好品質(zhì)敢承諾，所有產(chǎn)品有任何質(zhì)量問(wèn)題，全部可免費(fèi)包換（除人為因素外）。

　　實(shí)驗(yàn)原理：
　　檢測(cè)試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。用純化的待測(cè)物質(zhì)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測(cè)物質(zhì)，再與HRP標(biāo)記的待測(cè)物質(zhì)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)濃度。

　　檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本搜集：
　　1、標(biāo)本搜集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，若不能馬上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)防止反復(fù)凍融。
　　2、血清：運(yùn)用不含熱原的試管，操作過(guò)程中防止任何細(xì)胞刺激，搜集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心腸別離。
　　3、血漿：3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
　　4、細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
　　5、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
　　6、保存：假如樣本搜集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，防止反復(fù)凍融，在室溫下解凍并保證樣品均勻地充沛解凍。

　　檢測(cè)試劑盒常見問(wèn)題解析：
　　1、加樣量紛歧致？
　　解決方法：樣品稀釋前應(yīng)充沛混勻，盡可能運(yùn)用同一移液器并裝緊吸嘴。
　　2、樣品數(shù)量多少紛歧，加樣時(shí)刻有長(zhǎng)有短？
　　解決方法：重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)刻盡可能與初次接近。
　　3、保溫時(shí)刻紛歧致，洗刷條件紛歧致，操作人員紛歧致？
　　解決方法：重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與前次保持一致，以掃除這些要素造成的紛歧致的可能性。

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